摘要：
目的 建立可溶性表达、纯化有活性的重组全长人PPARγ蛋白的方法。方法 构建pReceiver-B13-SUMO-PPARγ质粒转化至EscherichiacoliBL21(DE3)细胞，进行诱导表达，优化细胞生长环境；利用亲和色谱法纯化可溶性重组全长人PPARγ蛋白；以罗格列酮为阳性配体，以GW9662为拮抗剂，采用分子排阻色谱-高效液相色谱法(SEC-HPLC)法测定重组全长人PPARγ蛋白与配体药物的结合活性。结果 在优化条件(16℃?IPTG浓度0.4mM、诱导时间18~20h)下能获得高水平、可溶性重组全长人PPARγ蛋白；经亲和色谱一次纯化，得到纯度约为90%的重组全长人PPARγ蛋白；该蛋白与罗格列酮特异性结合率约为70%，Kd为500nM。结论 本文所建立的方法能可溶性表达、纯化得到有活性、纯度较高的重组全长人PPARγ蛋白，为该蛋白功能研究和配体药物筛选奠定基础。
