摘要： 目的 利用RNA干扰技术下调SMMC-7721肝癌细胞中CD133的表达，观察其在肝癌细胞增殖和侵袭方面的作用。方法 构建CD133特异性的siRNA真核表达载体，转染SMMC-7721肝癌细胞并筛选出稳定表达siRNA的转染克隆；应用RT-PCR和Western blot检测CD133mRNA和蛋白的表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；MTT法和Transwell法检测细胞体外增殖和侵袭能力。结果 成功构建表达质粒PGPH1/GFP/Neo-shGAPDH、PGPH1/GFP/Neo-shNC、PGPH1/GFP/Neo-CD133-1和PGPH1/GFP/Neo-CD133-2，并转染SMMC-7721肝癌细胞。筛选后得到稳定的细胞克隆。RT-PCR和Western blot检测显示转染PGPH1/GFP/Neo-CD133-1和PGPH1/GFP/Neo-CE133-2后CD133mRNA和蛋白表达均受到显著抑制，mRNA抑制率分别为42.98%和61.16%；蛋白表达抑制率分别为49.46%59.15%。与未转染组和PGPH1/GFP/Neo-shNC组相比，PGPH1/GFP/Neo-CD133-2组细胞凋亡比例明显增加（P<0.05）；PGPH1/GFP/Neo-CD133-2组细胞的增殖和侵袭能力也受到显著抑制（P<0.05）。结论 靶向CD133的RNA干扰能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞中的CD133表达，诱导细胞凋亡，抑制细胞的增殖和侵袭。
