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›› 2011, Vol. 33 ›› Issue (1): 33-35.

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东亚三角涡虫肌球蛋白轻链(MLC)融合蛋白原核表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

余淑英 赵博生   

  1. 山东理工大学生命科学学院,淄博 255049
  • 出版日期:2011-02-25 发布日期:2011-12-06

  • Online:2011-02-25 Published:2011-12-06

摘要: 构建了涡虫肌球蛋白轻链融合蛋白原核表达载体,并进行表达,根据涡虫基因文库中肌球蛋白轻链(Mlc)基因完整的ORF序列设计合成特异性引物,通过PCR扩增涡虫Mlc基因,并插入到融合蛋白原核表达载体PET-28a中,转化宿主菌BL21(DE3)细胞,0.4 mMol/L的IPTG诱导表达MLC蛋白.重组质粒测序和酶切结果显示Mlc基因已正确插入PET-28a中,重组蛋白经SDS-PAGE在18.2 KD处有一条明显的蛋白表达条带。western blot检测得到同样大小的条带。结果表明,涡虫His-MLC融合蛋白已成功表达。

关键词: 东亚三角涡虫, 肌球蛋白轻链, 原核表达, 蛋白质印迹法