摘要:
目的 通过检测川芎嗪(TMP)对NB4细胞增殖?凋亡及端粒酶活性的影响,以及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)?c-mycmRNA表达水平的影响,探讨TMP抗肿瘤的作用机制。方法 采用MTT法检测细胞增殖;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;PCR-TRAP银染法定性检测端粒酶活性;PCR-TRAP-ELISA法定量检测端粒酶活性;RT-PCR法检测细胞的hTERT?c-mycmRNA表达。结果 MTT结果显示TMP浓度100~500ug/ml能明显抑制NB4细胞的增殖(P<0.01),且抑制作用呈剂量时间依赖性;流式细胞术结果显示TMP浓度300ug/ml?500ug/ml,作用NB4细胞48h?72h后,细胞凋亡率明显升高(P<0.05);PCR--TRAP银染法定性检测端粒酶活性结果显示TMP各浓度组,作用NB4细胞72h后,条带明显变浅;PCR-TRAP-ELISA法定量检测端粒酶活性结果显示TMP各浓度组,作用NB4细胞72h后,端粒酶活性(A450nm)明显降低(P<0.05);RT-PCR结果显示NB4细胞的hTERT?c-mycmRNA表达水平随TMP浓度增加?作用时间延长逐渐降低,且二者降低程度呈正相关。结论 本实验提示TMP可能通过下调NB4细胞的c-myc表达来抑制细胞增殖和促进细胞凋亡,同时通过下调hTERT来降低细胞的端粒酶活性以发挥其抗肿瘤的作用。