›› 2012, Vol. 34 ›› Issue (3): 493-496.

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携SiRNA的聚乳酸羟基乙酸微球对Bel-7402/5-Fu细胞MDR1基因沉默作用的研究

张雷 刘长安 印国兵 秦易 王宗鼎   

  1. 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科,重庆 400010
  • 出版日期:2012-06-25 发布日期:2012-07-12

  • Online:2012-06-25 Published:2012-07-12

摘要:

目的 探讨携SiRNA的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)微球通过沉默肝癌耐药细胞多药耐药基因(MDR1)基因,实现肝癌耐药的逆转。方法 合成针对MDR1的RNA干扰小片段(SiRNA),通过超声复乳法制备携药微球,转染肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu。运用Real-timePCR与Westernblot方法,通过检测其mRNA及P糖蛋白表达水平,评价RNA干扰对MDR1表达的影响。MTT法检测RNA干扰逆转Bel-7402/5-Fu细胞耐药性的效果,通过实验组细胞和对照组细胞之间的半数抑制剂量(IC50),计算RNA干扰组细胞的耐药逆转倍数。结果 在肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu中,RNA干扰明显抑制了MDR1mRNA和蛋白产物P糖蛋白的表达水平,且出现了P糖蛋白的持续低表达。MTT法显示,相同药物浓度下,实验组细胞生长明显受到抑制,表明其耐药性明显下降,其耐药逆转倍数为11.56。结论 携SiRNA的PLGA微球能够有效减少肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的MDR1mRNA及P糖蛋白的表达水平,降低其耐药性。

关键词: 肝肿瘤, 癌, 细胞系, 肿瘤RNA, 小分子干扰, P糖蛋白, 聚乙醇酸, 乳酸, 微球体