摘要:
目的 探讨携SiRNA的聚乳酸羟基乙酸(PLGA)微球通过沉默肝癌耐药细胞多药耐药基因(MDR1)基因,实现肝癌耐药的逆转。方法 合成针对MDR1的RNA干扰小片段(SiRNA),通过超声复乳法制备携药微球,转染肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu。运用Real-timePCR与Westernblot方法,通过检测其mRNA及P糖蛋白表达水平,评价RNA干扰对MDR1表达的影响。MTT法检测RNA干扰逆转Bel-7402/5-Fu细胞耐药性的效果,通过实验组细胞和对照组细胞之间的半数抑制剂量(IC50),计算RNA干扰组细胞的耐药逆转倍数。结果 在肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu中,RNA干扰明显抑制了MDR1mRNA和蛋白产物P糖蛋白的表达水平,且出现了P糖蛋白的持续低表达。MTT法显示,相同药物浓度下,实验组细胞生长明显受到抑制,表明其耐药性明显下降,其耐药逆转倍数为11.56。结论 携SiRNA的PLGA微球能够有效减少肝癌耐药细胞Bel-7402/5-Fu的MDR1mRNA及P糖蛋白的表达水平,降低其耐药性。