摘要:
目的 TCF7L2是一种重要的转录因子,与2型糖尿病(T2DM)发生发展密切相关。本研究探讨慢病毒介导的RNA干扰抑制TCF7L2基因表达对人肝癌细胞株HePG2胰岛素降解酶(IDE)基因的影响。方法 以人TCF7L2mRNA编码序列作为干扰靶点,构建TCF7L2特异性短发卡RNA慢病毒表达载体(LV-TCF7L2-shRNA)感染HePG2细胞。应用实时定量PCR及Westernblot检测转染后TCF7L2与IDE表达的变化。结果 成功构建TCF7L2shRNA慢病毒载体LV-TCF7L2-shRNA。qPCR及Westernblot结果显示干扰组HePG2细胞TCF7L2和IDEmRNA及蛋白的表达水平较空白组及阴性对照组显著降低(P<0.05)。结论 LV-TCF7L2-shRNA载体有效地抑制了IDE的表达,结果证明TCF7L2是IDE表达调控中重要的转录因子,为探讨TCF7L2与IDE在2型糖尿病发病机制中的作用奠定了基础。