›› 2011, Vol. 33 ›› Issue (6): 1074-1077.

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姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR的双向凝胶电泳技术的建立及优化

李雷 傅仲学 覃勇 卢伟东 吴星烨 汤为学   

  1. 重庆医科大学附属第一医院外三科,重庆 400016
  • 出版日期:2011-12-25 发布日期:2012-02-24

  • Online:2011-12-25 Published:2012-02-24

摘要:

目的 建立并优化姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR蛋白质组的双向电泳技术。方法 姜黄素作用于人结肠癌细胞HCT-8/VCR,提取蛋白质。对双向凝胶电泳中蛋白质样品的处理,蛋白上样量,IPG胶条的选择,以及聚焦条件等进行调整和优化。结果 采用瓶内刮取的方法裂解细胞,pH3-10NL的胶条,上样量200ug,延长除盐时间,聚焦60000伏小时,可以得到分辨率较高、重复性较好的双向电泳图谱。结论 初步建立了分辨率较高且重复性较好的姜黄素逆转人结肠癌细胞HCT-8/VCR蛋白质双向凝胶电泳图谱。

关键词: 蛋白质组学, 双向凝胶电泳, 姜黄素, 多药耐药, 结肠癌