›› 2011, Vol. 33 ›› Issue (5): 885-887,907.

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si-DNMT1对肝门部胆管癌细胞抑癌基因甲基化的作用

向吉锋 罗放 王济明 李修红   

  1. 重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,重庆 400016
  • 出版日期:2011-10-25 发布日期:2011-12-01

  • Online:2011-10-25 Published:2011-12-01

摘要:

目的 研究RNA干扰对肝门部胆管癌细胞株QBC939抑癌基因甲基化的影响,初步探讨其在胆管癌治疗中的价值。方法 构建靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体;运用脂质体介导法将其转染人胆管癌细胞QBC939;RT-PCR法检测不同时间点hDNMT1、CDH1、p15的表达水平;MSP方法检测转染前后抑癌基因CDH1、p15的甲基化状态;MTT检测各组细胞的增殖能力。结果 1)hDNMT1的基因沉默恢复了抑癌基因CDH1、p15的表达水平;2)CDH1、p15的表达沉默是由启动子高甲基化导致的;3)转染靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体能有效地抑制QBC939的增殖能力。结论 靶向hDNMT1的发夹式siRNA表达载体能有效、持续、稳定发挥对hDNMT1的基因沉默作用,恢复抑癌基因CDH1、p15的表达水平,从而抑制QBC939肿瘤细胞增殖。

关键词: 发夹式siRNA, 肝门部胆管癌, 甲基化, 抑癌基因, hDNMT1