]*>","")" /> 稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究

›› 2011, Vol. 33 ›› Issue (1): 137-140.

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稳定表达绿色荧光蛋白的B16细胞株的建立及其生物学特性研究

张弘 丁晓燕 方廖琼 王智彪 乔海 刘阳 张小梅   

  1. 重庆医科大学生物医学工程系,省部共建超声医学工程国家重点实验室,超声医学工程重庆市市级重点实验室,重庆 400016
  • 出版日期:2011-02-25 发布日期:2011-12-06

  • Online:2011-02-25 Published:2011-12-06

摘要: 目的 建立稳定表达绿色荧光蛋白的B16黑色素瘤细胞株,并研究其生物学特性。方法 转染增强型绿色荧光蛋白基因入B16细胞,经G418联合单克隆培养,筛选阳性细胞。激光共聚焦荧光显微镜观察EGFP阳性细胞形态;流式细胞仪检测细胞内EGFP基因的蛋白表达;RT-PCR检测EGFP基因的mRNA表达;皮下接种及MTT法评价细胞在体内外的生长特性。结果 流式细胞仪检测表达绿色荧光蛋白的细胞阳性率为99.81%,RT-PCR检测到EGFP基因的mRNA阳性表达。生长曲线显示其体外增殖趋势与B16相似,EGFP-B16体内成瘤速度较B16慢(p<0.05)。结论 稳定表达绿色荧光蛋白的EGFP-B16细胞株成功建立,可作为进一步研究恶性黑色素瘤的材料。

关键词: 稳定转染, 增强型绿色荧光蛋白, B16黑色素瘤细胞, 基因