摘要： 目的 采用酶消化结合组织块培养法对山羊颞下颌关节（temporomandibular joint，TMJ）盘细胞进行体外培养和扩增，探索TMJ关节盘细胞体外培养及扩增的新方法。方法 在无菌条件下，切取一月龄山羊TMJ关节盘，剪至1.0 mm3的碎块，用0.25%胰酶、0.01% I型胶原酶消化关节盘组织块，将消化好的组织块置入6孔板中培养。在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化及贴壁率，甲苯胺蓝染色、I型胶原免疫组化染色进行细胞鉴定，测定其生长曲线。结果 原代培养的关节盘纤维软骨细胞4天可观察到贴壁细胞，7天贴壁细胞逐渐增多，第10天时细胞彼此相连，铺满平底，细胞以梭形为主，部分多角形。传代后12小时贴壁率达90%，大部分为多角形，4~5天即可长满瓶底。甲苯胺蓝染色可见异染颗粒，胶原免疫组化染色胞浆内可见棕黄色颗粒。结论 酶消化结合组织块培养法培养的山羊TMJ关节盘细胞具有较强的增殖能力，可作为TMJ关节盘组织工程中获取大量原代细胞的实用方法。
