摘要：

目的 构建反义Ki-67和Bcl-2双表达载体用于肿瘤基因治疗的研究。方法 从SGC-7901细胞总RNA中逆转录扩增Ki-67和Bcl-2cDNA，T-A克隆到pMD18-TSimple载体。Ki-67经BamH Ⅰ和Cla Ⅰ双酶切，Bcl-2经EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切后，分别反向插入pVITRO2的多克隆位点1(mcs1)和2(mcs2)，构建单表达质粒pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2，再将Bcl-2 EcoR Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切，反向插入pVITRO2-AsKi-67的mcs2，构建pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2双表达质粒。结果 限制性内切酶和测序表明单表达质粒pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2以及双表达质粒pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2构建成功。结论 本研究成功构建了pVITRO2-AsKi-67和pVITRO2-AsBcl-2单表达质粒，及pVITRO2-AsKi-67-AsBcl-2双表达质粒。

关键词: Ki-67, Bcl-2, 双顺反子载体pVITRO2, 反义RNA

中图分类号: 

• R73-36